茶树中存在的多酚化合物泛指一类性质各异的多羟基酚(以邻位和连位为主)衍生而成的复杂有机混合物,主要为*烷醇(及其糖甙)、酚酸(及其酯)以及一些结构更为复杂的酚性衍生物。虽然成品茶的品质不直接取决于可溶性多酚化合物的总量,但茶多酚是影响茶叶品质的重要生化因素之一,它在鲜叶中的含量可以反映茶叶次生代谢的强度,也可以作为预测茶叶品质的一个重要指标。茶多酚具有抗氧化、清除自由基、降血脂、降血压、预防心血管病、抗突变、抗辐射、抗癌防癌、抑菌、防龋等功能。
茶多酚含量测定多采用高锰酸钾法和酒石酸铁法。
1.仪器设备
水浴、高速离心机、分光光度计、烘箱等。
2.操作方法
1)高锰酸钾法
(1)样品制备:取茶叶若干,先用不锈钢刀切碎、混匀,然后准确称量10g放入烧杯,加沸水50ml,于沸水浴中浸提10min,取出稍冷,倒出上清液,再加入50ml沸水,继续于沸水浴中浸提5min,把两次浸提液连同残渣一起倒入离心试管中,×g离心20min,取出离心试管置于架上。
(2)测定:用移液管吸取上清液10ml,放入大白磁皿中,加20ml水和5ml0.1%靛红,以0.04mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至亮*色,记下消耗高锰酸钾溶液的体积V(ml)。用蒸馏水10ml,重复上述操作,记下消耗高锰酸钾溶液的体积V空白(ml)。
(3)结果计算
2)酒石酸铁法
(1)茶多酚测定
a.取茶树鲜叶,用不锈钢剪刀快速剪成碎片,置带塞子的三角瓶中,以1g鲜叶加入10ml95%甲醇的比例加入提取溶剂。于沸水浴中浸提33min,冷至室温,取0.1ml加1.9ml蒸馏水,2ml酒石酸铁溶液[1g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和5g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)分别溶解于蒸馏水中,混合后定容至1L,可稳定10d和6ml磷酸缓冲液(pH5.7),混匀,以试剂为空白对照,于nm处测光密度。
b.用茶多酚(纯度95%以上)配制标准溶液,稀释成0,20,40,80,μl/ml系列浓度,分别取2ml,加酒石酸铁溶液2ml和磷酸缓冲液6ml,混匀后测nm波长光密度,制作茶多酚含量光密度曲线。
c.根据样品所测出的光密度值,在标准曲线上查出茶多酚的含量,计算鲜叶样品中茶多酚的百分含量(以鲜重计)。